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求助SiRNA和lipo3000转染的一些问题

脂质体的转染毒性是最大的,很明显,那么多的细胞死亡是由于转染的细胞毒性导致的。对于这一点我有两个建议,一个是减少DNA的用量,我一般做转染,对于任何细胞,只要是12孔板,一般都是用1ugDNA,这个量绝对够了。,因为质粒转染进入细胞的本质...

有,不利于转染复合物的形成。 具体效果,可以对比你此次试验与正常实验的结果。

三到五小时。 siRNA (Small interfering RNA),是一种小RNA分子(~21-25核苷酸),由Dicer(RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成。SiRNA是siRISC的主要成员,激发与之互补的目标mRNA的沉默。

当然可以啊,要多少lipo2000是根据细胞种类来看的,有些细胞对lipo2000毒性的耐受力差,就不能多用。我知道的HEK 293细胞一般可以用到30ul的lipo2000,而siRNA的用量一般是1ug/1ul lipo2000.

跟质粒一样啊 用lipo什么的脂质体转就行了 一般转染试剂的说明书上都会说的4211

转入质粒的原理:质粒上连的片段转录后能够自身互补形成双链(shRNA),在细胞内被细胞自己剪切成siRNA。 两种转染方法在功能上是一致的。但是siRNA转染以后发挥作用的时间较短,用于短期抑制试验(一般维持一周以内)。而因为质粒存在于细胞内...

用针对表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的小分子多肽配体D4修饰PEG化的阳离子脂质体,观察其提高质粒DNA和siRNA对肿瘤细胞转染效率的作用。方法:将D4连接在DSPE-PEG2000的末端以修饰PEG化的阳离子脂质体,检测该载体系...

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